液氮儲(chǔ)罐細(xì)胞冷凍
來源:液氮儲(chǔ)罐 發(fā)布時(shí)間:2016-04-10 00:24
液氮儲(chǔ)罐細(xì)胞凍存是細(xì)胞生存的重要要領(lǐng)之一。使用凍存技能將細(xì)胞置于-196~C液氮中低溫生存,可以使細(xì)胞臨時(shí)離開生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性生存起來,如許在必要的時(shí)間再蘇醒細(xì)胞用于實(shí)行。并且適度地生存肯定量的細(xì)胞,可以防備因正在造就的細(xì)胞被污染或其他不測(cè)變亂而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以使用細(xì)胞凍存的情勢(shì)來購(gòu)置、寄贈(zèng)、互換和運(yùn)送某些細(xì)胞。 細(xì)胞凍存時(shí)向造就基中參加掩護(hù)劑——終濃度5%~15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)低落,加之在遲鈍凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,淘汰了冰晶形成,從而制止細(xì)胞毀傷。尺度冷凍速率開始為-1 到 -2℃/min,當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加快,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。
現(xiàn)在常用的掩護(hù)劑為二甲亞砜(DMSO)和甘油,它們對(duì)細(xì)胞無毒性,分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞。
實(shí)行質(zhì)料
儀器:液氮儲(chǔ)罐、凍存管(塑料螺口專用凍存管或安瓿瓶)、離心管、吸管、離心機(jī)等
試劑:0.25%胰酶、造就基、含掩護(hù)劑的造就基(即凍存液)
附:凍存液配制:造就基參加甘油或DSMO,使其終濃度達(dá)5-20%。掩護(hù)劑的種類和用量視差別細(xì)胞而差別。配好后4℃下生存。
在生產(chǎn)過程中,由于換熱器管板受水分沖刷、氣蝕和微量化學(xué)介質(zhì)的腐蝕,管板焊縫處經(jīng)常出現(xiàn)滲漏,導(dǎo)致水和化工材料出現(xiàn)混合,生產(chǎn)工藝溫度難以控制,致使生成其它產(chǎn)品,嚴(yán)重影響產(chǎn)品質(zhì)量,降低產(chǎn)品等級(jí)。冷凝器管板焊縫滲漏后,企業(yè)通常利用傳統(tǒng)補(bǔ)焊的方法進(jìn)行修復(fù),管板內(nèi)部易產(chǎn)生內(nèi)應(yīng)力,且難以消除,致使其它換熱器出現(xiàn)滲漏,企業(yè)通過打壓,檢驗(yàn)設(shè)備修復(fù)情況,反復(fù)補(bǔ)焊、實(shí)驗(yàn),2~4人需要幾天時(shí)間才能修復(fù)完成,使用幾個(gè)月后管板焊縫再次出現(xiàn)腐蝕,給企業(yè)帶來人力、物力、財(cái)力的浪費(fèi),生產(chǎn)成本的增加。
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